進(jìn)樣閥在進(jìn)樣過程中,必須是非常清潔的,否則得不到較好的結(jié)果。進(jìn)樣閥切換到進(jìn)樣位置(Inject)后,要在此位置保持一段時(shí)間,使活動(dòng)相充分沖洗樣品定量管,這樣可以保證有較高的度,而且不用另外再?zèng)_洗樣品定量管。這種由色譜儀器控制的沖洗顯然要比手動(dòng)沖洗更好些。留意:沖洗需要的活動(dòng)相體積至少為所進(jìn)樣品體積的10倍。例如,假如取20μL樣品至100μL樣品定量管中,而活動(dòng)相此時(shí)的流速為1mL/min,則需要在進(jìn)樣位置至少保持12s,即:20μL×10/1000μL·min-1=0.2min=12s。
當(dāng)樣品定量管經(jīng)過充分的沖洗后,可以將旋柄轉(zhuǎn)回取樣位置(Load),也可以繼續(xù)保持在進(jìn)樣位置,到下次取樣前才切換回取樣位置。在切換回取樣位置時(shí),將樣品進(jìn)樣針或微量樣品進(jìn)樣針從進(jìn)樣閥中拔出。
為防止交叉污染,正常情況下不必每次進(jìn)樣后都沖洗進(jìn)樣閥注射針導(dǎo)進(jìn)口。進(jìn)樣閥內(nèi)根據(jù)設(shè)計(jì)的直接連接進(jìn)樣孔,可以使注射針頭的前端直接連接到樣品定量管的末端,沒有其他空間供樣品殘留。這樣在下一次進(jìn)樣時(shí),就不會(huì)有上一次殘留的樣品進(jìn)進(jìn)樣品定量管。
但是在進(jìn)樣針頭插進(jìn)或拔出過程中,會(huì)有痕量的樣品沉積在針頭密封區(qū)域。精密的測定顯示這種殘留有1nL ~ 10nL。這表明進(jìn)20μL樣品,會(huì)殘留0.005% ~ 0.05%。每次進(jìn)樣后沖洗注射針導(dǎo)進(jìn)口可以將此殘留沖洗干凈。沖洗注射針導(dǎo)進(jìn)口的過程為:設(shè)定活動(dòng)相的流速為0.1mL/min ~ 1mL/min,將注射針導(dǎo)進(jìn)口沖洗頭(Rheodyne部件號(hào)7125-054)連接到一只體積相對較大的注射器上,用大量的活動(dòng)相只在進(jìn)樣位置清洗注射針導(dǎo)進(jìn)口。這樣進(jìn)進(jìn)進(jìn)樣閥中的液體繞過樣品定量管由樣品溢出管5# 口排出。這一過程可以將注射針導(dǎo)進(jìn)口、引導(dǎo)管、注射針導(dǎo)進(jìn)管和注射針密封圈*清洗。而采用注射器*插進(jìn)式的沖洗方式,則不能全部清洗上述部分的表面。在取樣位置將注射針插進(jìn)注射針導(dǎo)進(jìn)口時(shí),針頭推動(dòng)注射針密封圈內(nèi)少量樣品液體(上一次沖洗注射針導(dǎo)進(jìn)管留下的)進(jìn)進(jìn)樣品定量管。當(dāng)該樣品液體與所用的活動(dòng)相組成不同,且同時(shí)采用部分布滿定量管進(jìn)樣方式時(shí),在高靈敏度的檢測器上可能出現(xiàn)怪峰。所以沖洗注射針時(shí)用活動(dòng)相沖洗。
假如已發(fā)現(xiàn)有嚴(yán)重的交叉污染現(xiàn)象,請檢查是否有下列原因造成:
?、?使用的注射針頭長度不夠(針頭的長度至少要5cm),注射針末端不能到達(dá)定子表面。
?、?注射針沒有充分插進(jìn)注射針導(dǎo)進(jìn)口。
?、?注射針導(dǎo)進(jìn)口內(nèi)的污染物或針頭密封磨損下來的削片,使注射針頭末端不能接觸定子表面。
假如不考慮交叉污染,每進(jìn)樣10次或20次沖洗一下注射針導(dǎo)進(jìn)口,這樣可以保證注射針導(dǎo)進(jìn)管內(nèi)布滿流體。在注射針插進(jìn)或拔出的過程中,清洗注射針頭或稀釋污染這一區(qū)域的樣品的同時(shí)也使注射針導(dǎo)進(jìn)口和樣品溢出5# 口布滿流體,從而防止空氣進(jìn)進(jìn)樣品管