處于良好操縱狀態(tài)的泵,應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn);保存時間的重復(fù)性好。在等度洗脫時壓力波動小于2%。梯度洗脫時壓力變化應(yīng)是緩慢平穩(wěn)的。
1 在日常使用過程中出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。主要原因有幾點(diǎn):
1.1 管路里有氣泡。
1.2 輸進(jìn)單向閥失效所致,這也是經(jīng)常遇見的。
1.3 密封圈磨損導(dǎo)致泄漏所造成。
2 壓力不穩(wěn)的排除方法如下:
2.1 排除管路里氣泡的方法是:
打開排空閥,用針筒多抽幾下,排出氣泡。再用活動相沖洗一段時間。為了加快排出氣泡,還可以關(guān)緊排空閥,堵住檢測器上的背壓管,使流通池的壓力增加,趕出氣泡(但需留意不能壓力太高,以免損壞流通池)。
2.2 排除單向閥失效的方法為:
2.2.1 造成單向閥失效原因:
2.2.1.1 泵內(nèi)殘留活動相與寶石球粘連。如長期不使用輕易造成類似情況,所以在長期不使用的情況下,應(yīng)每二周用甲醇作為活動相,開機(jī)沖洗1小時,使管路布滿。
2.2.1.2 活動相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。固然活動相是HPLC級的,又經(jīng)過過濾,但長期使用后仍難免會產(chǎn)生污染。
2.2.2 判定單向閥失效的方法:
2.2.2.1 將泵接上蒸餾水作為活動相。(請勿打開UV檢測器與工作站)。
2.2.2.2 打開排空閥,用30 ml的針筒抽出些活動相,確認(rèn)泵中已有該活動相,然后將針筒內(nèi)的液體排出,并重新接在排空閥上。
2.2.2.3 將泵設(shè)置流量為5ml/min,沖洗5min(留意:此時排空閥仍要打開,否則將沖壞色譜柱)。
2.2.2.4 沖洗完畢后,查看針筒內(nèi)活動相體積是否為25ml(5×5=25),若正確,則說明該泵在低壓情況下*;若不正確,則說明該泵中某一單向閥失效(一般多為輸進(jìn)單向閥)。
2.2.2.5 如是雙泵梯度分析系統(tǒng),泵壓力不穩(wěn)一般是其中一臺壓力不穩(wěn)所致,可逐個分析。
2.2.3 單向閥失效處理方法:
2.2.3.1 擰下輸進(jìn)單向閥(一共兩個)。
2.2.3.2 將2個單向閥放進(jìn)有蒸餾水的超聲波清洗器,清洗10分鐘。
2.2.3.3 用沖洗工具沖洗二、三次。沖的時候留意要用手按住單向閥前頭,防止把閥內(nèi)零件沖失。
2.2.3.4 完畢后,將輸進(jìn)單向閥裝回原位即可(單向閥是高壓部件,須擰緊,防止泄漏)。
若梯度系統(tǒng)兩個泵在低壓狀態(tài)下流量都正確,則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測試。