氣相色譜法是一種以氣相為流動(dòng)相的色譜方法。樣品流經(jīng)氣體系統(tǒng)并被氣化,最后進(jìn)入充滿填充物的色譜柱以實(shí)現(xiàn)有效分離。氣相色譜法具有高靈敏度、樣品用量少、分離能力強(qiáng)、選擇性好、應(yīng)用范圍廣、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。
液相色譜法使用填充層、紙和薄板作為固定相。液相色譜在室溫下操作,不需要考慮在物質(zhì)分離過程中樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的影響。因此,液相色譜可用于分離和分析高熱敏性、難汽化和非揮發(fā)性物質(zhì)。根據(jù)其分離原理,液相色譜可分為四種類型:吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠色譜。液相色譜法的工作原理與經(jīng)典液相色譜法類似,主要區(qū)別在于填充顆粒的大小。液相色譜法主要用于分離分子量大、沸點(diǎn)高和不同極性的有機(jī)化合物。由于運(yùn)輸流動(dòng)相需要高壓,因此液相色譜也被稱為高壓液相色譜。
氣相色譜譜圖和液相色譜譜圖可以用相同的方法解析。檢測器輸出的數(shù)據(jù)為線形圖,檢測到的化合物數(shù)隨時(shí)間不同而變化。揮發(fā)性的化合物的峰首先出現(xiàn)在圖表上。圖中隨后出現(xiàn)的峰表示混合物的揮發(fā)性逐漸降低。研究人員可以使用這些色譜圖進(jìn)一步分解樣品中混合物的化學(xué)性質(zhì)。峰尺寸的比例與樣品中物質(zhì)的含量有關(guān)。峰下的面積用于確定樣本大小。例如,要確定樣品中的成分,首先需要分析已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,將標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖上的保留時(shí)間和峰面積與測試樣品進(jìn)行比較,獲得樣品中的目標(biāo)化合物濃度。
在氣相色譜中,樣品溶液進(jìn)入蒸發(fā)室后,由載氣(載氣通常為氮?dú)饣蚝?輸送進(jìn)入色譜柱。在色譜柱中分離出不同的成分,最后流出色譜柱。柱中的活動(dòng)由檢測器進(jìn)行檢測。每個(gè)成分逐一檢測之后,記錄器、積分器或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)會(huì)記錄下這些色譜信號(hào)。
在液相色譜中,液相流動(dòng)相流經(jīng)輸液泵,與樣品溶液混合,最后流出色譜柱。吸附分離在柱中進(jìn)行。在色譜檢測站,檢測器最終將所有成分轉(zhuǎn)換成電信號(hào),或相應(yīng)的樣品峰。
氣相色譜可用于手性化合物的化學(xué)分離實(shí)驗(yàn)、對(duì)羥基苯甲酸酯食品防腐劑中對(duì)羥基苯甲酸酯的分離與測定、各種農(nóng)藥的分離、血漿中摻雜的檢測以及環(huán)境污染物化學(xué)成分的檢測等多方面研究。液相色譜法在食品檢測,例如食品中有毒有害物質(zhì)、微生物產(chǎn)品、營養(yǎng)物和添加劑的檢測、環(huán)境中農(nóng)藥污染的潛在生物標(biāo)志物的研究以及血漿和尿液中毒素的測定等。
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